Презентация «Серологические реакции»
Смотреть слайды в полном размере 
Вы можете ознакомиться с презентацией онлайн, просмотреть текст и слайды к ней, а также, в случае, если она вам подходит - скачать файл для редактирования или печати. Документ содержит 39 слайдов и доступен в формате ppt. Размер файла: 3.18 MB
Pic.1
Куб ГАУ Куб ГАУ кафедра микробиологии, эпизоотологии и вирусологии Ведущий преподаватель доктор биологических наук, профессор Нино Нодариевна Гугушвили
Pic.2
Лабораторные занятия по общей микробиологии для факультета ветеринарной медицины
Pic.3
Тема Серологические реакции.
Pic.4
Задание 1. Ознакомиться с сущностью, компонентами, методами постановки и учёта серологических реакций. 2. Реакция агглютинации (РА) и её модификации, реакция преципитации (РП), реакция диффузной …
Pic.5
Ознакомиться с сущностью, компонентами, методами постановки и учёта серологических реакций. Характеристика серологических реакций Соединение антигена с антителом. Выяснение механизмов соединения …
Pic.6
Детерминантные группы антигена несут определенный электрический заряд. В процессе индукции антител они определяют специфичность формирующихся антител.
Pic.7
Концевые части полипептидных цепей антител имеют заряд, противоположный заряду детерминантной группы антигена. Полярные группы антигена и антитела, обладающие противоположными зарядами, соединяются …
Pic.8
При оптимальном соотношении антитела с антигеном происходит полное взаимное насыщение всех валентностей и образуются прочные комплексы, выпадающие в осадок. Если имеется избыток антител, часть …
Pic.9
Специфичность антител, обуславливающая механизм их взаимодействия с антигеном, связана конфигурацией активных центров, которые должны строго соответствовать детерминантным группам антигена. В основе …
Pic.10
Реакция между антителом и антигеном протекает в две стадии: первая невидимая – специфическая (непосредственное соединение активного центра антитела с антигенной детерминантой), вторая видимая – …
Pic.11
Когда в реакции с антителами участвуют растворимые (молекулярные) антигены (белки или их комплексы с углеводами и липидами разного происхождения, бактериальные экстракты, лизаты и фильтраты бульонных …
Pic.12
Все серологические реакции в ветеринарии и медицине применяют как методы диагностики: определение антител и антигенов по известным сывороткам.
Pic.13
2. Реакция агглютинации (РА) Существует несколько методов постановки РА: пробирочный (объемный), капельный (на стекле, пластинчатый), антиглобулиновый тест (реакция) Кумбса, метод адсорбции …
Pic.14
РА на стекле 1. На обезжиренное предметное стекло наносят раздельно каплю известной агглютинирующей диагностической сыворотки и каплю физ. Раствора (контроль). Затем бактериологической петлёй берут …
Pic.15
Учёт результатов: Результат учитывают через 2-4 мин. В контрольной пробе изменения должны отсутствовать. При специфическом соответствии культуры бактерий иммунной сыворотки появляются хлопья …
Pic.16
2. На предметное стекло наносят 0,3 мл исследуемой сыворотки крови животного и 0,03 мл специфически окрашенного антигена клеток возбудителя. Компоненты тщательно перемешивают покачиванием стекла и …
Pic.17
Капельный (пластинчатый) метод РА На чистую стеклянную пластинку наносят микропипеткой исследуемую сыворотку по 0,04; 0,02; 0,01 и 0,05 мл. В каждой сыворотке добавляют по одной капле антигена …
Pic.18
Для ускорения реакции стекло слегка подогревают высоко над пламенем горелки. Положительный результат проявляется образованием в капле сыворотки комплекса антиген-антитело в виде крупинок, хлопьев, …
Pic.19
Кровяно-капельный метод РА На обезжиренное предметное стекло наносят каплю цельной крови, в неё добавляют каплю соответствующего антигена и смешивают стеклянной палочкой. В положительных случаях РА …
Pic.20
Реакция Кумбса К эритроцитам больного животного добавляют специфическую антиглобулиновую сыворотку (содержащую антитела против глобулинов сыворотки). Эритроциты агглютинируют.
Pic.21
Пробирочная РА Исследуемые сыворотки разводят в чистых сухих пробирках с ровным сферическим дном. Для каждой сыворотки берут отдельную пипетку . В отдельной пробирке готовят основное (исходное) …
Pic.22
В опытные пробирки разливают по 1 мл физ. раствора. Затем из исходного разведения 1 мл жидкости переносят в первую пробирку, смешивают с физ. Раствором (разведение 1:50) и 1 мл переносят во вторую …
Pic.23
Учет результатов: Проводят невооружённым глазом или с помощью агглютиноскопа, начиная с контрольных пробирок. Результат РА принято выражать количеством крестов: ++++ полное просветление жидкости, …
Pic.24
+++ неполное просветление жидкости, характер агглютината в виде перевёрнутого зонтика, при встряхивании разбивается на более мелкие глыбки, комочки. ++ обозначают РА неполную, с неполным просветление …
Pic.25
+ наличие небольшого нехарактерного осадка в виде «пуговки», жидкость мутная. При встряхивании осадок легко разбивается, увеличивая мутность. - вся жидкость в пробирке мутная, на дне пробирки …
Pic.26
Pic.27
Реакция преципитации (РП) Использую две модификации РП: реакция кольцепреципитации и реакция диффузной преципитации (преципитация в геле).
Pic.28
Реакция кольцепреципитации (РКП) В Уленгутовские пробирки (диаметр 2-3 мм) вносят Пастеровской пипеткой с тонким капилляром, не смачивая стенок пробирки 0,3-0,4 мл иммунной преципитирующей сыворотки. …
Pic.29
Учет результатов проводят на фоне тёмной бумаги. Через 1-2 минуты в зоне взаимной диффузии антигена и антител, на границе контакта компонентов, происходит помутнение среды, видимое сбоку как …
Pic.30
Реакция диффузной преципитации (РДП) Осуществляют путём наслаивания антигена на поверхность агара, содержащего специфическую сыворотку (по Удену), или путём внесения сыворотки в специальные лунки в …
Pic.31
Pic.32
Pic.33
Реакции иммунофлюоресценции (МФА) Это комплексный метод, сочетает в себе серологическую реакцию, при которой происходит специфическое взаимодействие антигена и антитела с образованием иммунного …
Pic.34
Существует 2 метода постановки МФА: Прямой МФА Непрямой МФА А) двухступенчатый МФА Б) трёхступенчатый МФА
Pic.35
Прямой МФА На предметное стекло с фиксированным антигеном наносят каплю люминесцирующей иммунной сыворотки в рабочем разведении, содержащей антитела против искомого антигена. Чтобы избежать …
Pic.36
Прямой МФА используют только для идентификации неизвестного антигена, к его недостатку относят необходимость приготовления люминесцирующей сыворотки для каждого вида идентифицируемого микроорганизма.
Pic.37
Оценка результатов МФА Учитывают яркость свечения, цвет, локализацию структуры свечения. Интенсивность свечения оценивают по 4-х крестовой системе: ++++ очень яркая флуоресценция по периферии …
Pic.38
Реакция нейтрализации Используется только для установления видовой принадлежности бактерийных токсинов в исследуемом материале и для определения активности антитоксических сывороток. В пробирки с …
Pic.39
Благодарю за внимание!
Если вам понравился сайт и размещенные на нем материалы, пожалуйста, не забывайте поделиться этой страничкой в социальных сетях и с друзьями! Спасибо!
