Презентация «Хроматографические методы анализа и их применение для контроля качества лекарственных средств (продолжение)»
Смотреть слайды в полном размере 
Вы можете ознакомиться с презентацией онлайн, просмотреть текст и слайды к ней, а также, в случае, если она вам подходит - скачать файл для редактирования или печати. Документ содержит 69 слайдов и доступен в формате ppt. Размер файла: 5.74 MB
Pic.1
Хроматографические методы анализа и их применение для контроля качества лекарственных средств (продолжение) Лекция №6 по курсу «Анализ и контроль качества лекарственных средств»
Pic.2
Жидкостная хроматография метод разделения, в котором подвижная фаза представляет собой жидкость, а неподвижная – твердую или жидкую фазу (не смешивающуюся с подвижной фазой). Различают: А. колоночную …
Pic.3
Pic.4
Оборудование (принципиальная схема)
Pic.5
Варианты проведения ЖХ 1. Изократический режим – постоянный состав ПФ в течение всего анализа (разделение родственных веществ, мало отличающихся по полярности). 2. Градиентный режим – изменяется …
Pic.6
Хроматографические колонки Стальные трубки внутренним диаметром 2-5 мм, длиной 5-30 см, с пористыми фильтрами с обоих концов. Для защиты аналитической колонки используются сменные предколонки (длиной …
Pic.7
Неподвижные фазы Общие требования: 1. Для обеспечения высокой эффективности разделения – размер частиц сорбента должен быть четко установленного размера (1,8 – 10 мкм), четко сферической формы. 2. …
Pic.8
Неподвижные фазы Классификация: 1. Полярные фазы (для прямофазной ЖХ) – немодифицированные силикагели, аминопропилсилилсиликагели, диольные производные силилсиликагеля, иониты (HILIC)
Pic.9
Выбор подвижной фазы для нормально-фазовой хроматографии
Pic.10
Неподвижные фазы 2. Среднеполярные фазы (для обращенно-фазовой ЖХ) – химически модифицированные силикагели с привитыми цианопропильными (СN), пентафторбензильными (PFP), фенильными (Ph), …
Pic.11
Неподвижные фазы 3. Неполярные фазы (для обращенно-фазовой ЖХ) – химически модифицированные силикагели с привитыми октильными (С8), октадецильными (С18), фенильными и октадецильными (С18-Ph), и др.
Pic.12
Pic.13
Принципы разделения 1. Полярные фазы – 1. 1. для разделения неполярных и малополярных веществ (слабо адсорбируются НФ) – малополярные элюенты (гексан (гептан) + низкая доля полярного растворителя, …
Pic.14
Принципы разделения 2. Средне- и неполярные фазы: 2. 1. Для разделения неполярных веществ используются ПФ с высоким (40-100%) содержанием органического растворителя (ацетонитрил, метанол, …
Pic.15
Механизмы удерживания
Pic.16
Закономерности удерживания в обращенно-фазовой ВЭЖХ Вытеснительная модель удерживания: 1. Из ПФ на поверхности неполярного/среднеполярного сорбента адсорбируется органический компонент (метанол, …
Pic.17
Влияние рН ПФ и температуры На неполярных фазах за счет дисперсионных взаимодействий лучше удерживаются неионизированные молекулы. При ионизации молекул удерживание при прочих равных условиях …
Pic.18
Детекторы в ЖХ 1. Детектор спектрофотометрический (область длин волн – УФ 190-360 нм (дейтериевая лампа), видимая – 360-900 нм – галогеновая лампа) – работает при фиксированных длинах волн (от 1 до …
Pic.19
2. Детектор на основе диодной матрицы – сканирование оптической плотности элюата в заданном диапазоне длин волн с большой скоростью (трехмерная хроматограмма – время-длина волны-сигнал детектора – е. …
Pic.20
СФ-детектор Детектор на основе диодной матрицы
Pic.21
Флуориметрический детектор Селективный детектор, основанный на измерении интенсивности флуоресценции разделенных веществ (устанавливаются длины волн возбуждения и эмиссии (испускания)).
Pic.22
Рефрактометрический детектор Основан на измерении величины преломления света элюата (универсальный детектор)
Pic.23
Электрометрические детекторы 1. Амперометрический детектор (детекция органических веществ, обладающих ОВ-свойствами) – может быть комплексный с ферментативными реакциями. 2. Кондуктометический …
Pic.24
Масс-спектрометрическое детектирование Универсальный (полный ионный ток) и селективный (сканирование индивидуальных масс ионов) детектор
Pic.25
Pic.26
Масс-спектрометрическое детектирование 1. Ионизация образца (ПФ + разделенные вещества) Принципы: 1. 1. электрораспылительная (ESI)
Pic.27
Pic.28
Примеры ионизации
Pic.29
Масс-спектрометрическое детектирование 1. 2. Химическая ионизация при атмосферном давлении:
Pic.30
1. 3. MALDI (ионизация лазерной десорбцией при взаимодействии с матрицей)
Pic.31
MALDI-TOF (ионизация лазерной десорбцией при взаимодействии с матрицей и времяпролетным детектированием)
Pic.32
Масс-анализаторы А. непрерывные масс-анализаторы 1. Магнитный и электростатический секторный масс-анализатор (Sector) 2. Квадрупольный масс-анализатор (Quadrupole mass analyzer) Б. импульсные …
Pic.33
Масс-спектрометрическое детектирование Достоинства: 1. Высочайшая чувствительность органических веществ, биополимеров (10-15 г/пробе). 2. Высокая специфичность детекции (последовательная …
Pic.34
Сравнение различных типов детекторов
Pic.35
Применение ВЭЖХ в фармацевтическом анализе 1. Идентификация веществ 1. 1. Сравнение времен удерживания со стандартным веществом
Pic.36
Применение ВЭЖХ в фармацевтическом анализе 1. 2. Идентификация по времена удерживания и спектрам поглощения пиков.
Pic.37
Применение ВЭЖХ в фармацевтическом анализе 1. 3. Идентификация веществ (образцов) по хроматографическому профилю (наличие определенного числа пиков с относительными временами удерживания по любому из …
Pic.38
Применение ВЭЖХ в фармацевтическом анализе 2. Определение специфических (родственных) примесей – полуколичественный анализ 2. 1. По стандартному образцу примеси
Pic.39
2. Определение специфических (родственных) примесей – полуколичественный анализ 2. 2. По стандартному раствору основного вещества, разведенному до определенного предела (0,05-5%).
Pic.40
2. Определение специфических (родственных) примесей – полуколичественный анализ 2. 3. Методом внутренней нормализации
Pic.41
Определение специфических (родственных) примесей 2. 4. Количественное определение (например, токсичные примеси) – методом градуировочного графика
Pic.42
2. 5. Определение энантиомерной чистоты
Pic.43
Применение ВЭЖХ в фармацевтическом анализе 3. Определение основных показателей готовых лекарственных средств – однородность дозированных единиц, тест «Растворение», количественное определение …
Pic.44
Капиллярный электрофорез Метод капиллярного электрофореза (КЭ) основан на разделении заряженных компонентов сложной смеси в кварцевом капилляре под действием приложенного электрического поля за счёт …
Pic.45
Капиллярный электрофорез МЭКХ - вариант капиллярного электрофореза, который позволяет проводить разделение соединений ионного и нейтрального характера при использовании ПАВ. Разделение …
Pic.46
После подачи к концам капилляра высокого напряжения (до 30 кВ), компоненты смеси начинают двигаться по капилляру с разной скоростью, зависящей в первую очередь от заряда и величины ионного радиуса и, …
Pic.47
Основные параметры КЭ 1. Время миграции (tм) - время, необходимое компоненту для прохождения им эффективной длины капилляра (Lэфф) от зоны ввода пробы (начала капилляра) до зоны детектирования; 2. …
Pic.48
Pic.49
Механизм ЭОП
Pic.50
Электроосмотический поток Уникальной особенностью ЭОП является плоский профиль потока в капилляре. Такой профиль выгоден, поскольку уменьшается размывание зон разделяемых веществ. Следует отметить, …
Pic.51
Капилляры для разделения Подавляющее большинство разделений в КЭ проводят с использованием кварцевых капилляров имеющих внешнее полимерное покрытие, обычно - полиимидное, улучшающее их механическую …
Pic.52
Ввод образца Проба может быть введена в капилляр электрофоретическим, электрокинетическим или вытеснительным способом. Объем вводимой пробы не превышает 2 нл, относительное стандартное отклонение …
Pic.53
Детектирование
Pic.54
Пример разделения неорганических ионов (КЭ) 1 – хлорид; 2 – нитрит; 3 – сульфат; 4 – нитрат; 5 – фторид; 6 – гидрофосфат; 7 – гидрокарбонат;
Pic.55
Pic.56
Термические методы анализа Основаны на установлении зависимостей различных физических или физико-химических свойств веществ от температуры (градиента температуры). А – Термогравиметрия Б – …
Pic.57
Pic.58
Pic.59
Pic.60
Pic.61
Pic.62
Pic.63
Pic.64
Pic.65
Pic.66
Pic.67
Pic.68
Pic.69
БЛАГОДАРЮ ЗА ВНИМАНИЕ!
Если вам понравился сайт и размещенные на нем материалы, пожалуйста, не забывайте поделиться этой страничкой в социальных сетях и с друзьями! Спасибо!
